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小G蛋白活性分析簡介




小G蛋白活性分析試劑盒主要用來檢測來自于細胞或者組織提取物中與GTP結合形式的蛋白活性。GTPase家族成員蛋白Rho和Ras有2種活性檢測方式:傳統的Pull-down beads方式及更高級的基于Elisa原理的G-LISA方式,請參閱以下介紹選擇適合您的分析方式。??



GTPase 活性分析選擇指南


分析因素

分析方式

推薦

分析原理

傳統的 Pull-Down方法

  • 采用涂有效應蛋白的親和珠子選擇性的結合活性的 GTPase.
  • 采用 western blot來檢測信號.?

傳統的 pull-down 分析方法適合于更多的常規實驗室

 

G-LISA方法

  • 采用涂有效應蛋白的96孔板來選擇性的結合活性 GTPase.
  • 采用enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)檢測信號.
G-LISA 分析方法具有更多的優勢

儀器

傳統的 Pull-Down方法

  • SDS-PAGE 裝置
  • Western blot 裝置

考慮實驗室實驗條件

G-LISA

  • 孔板混勻器
  • 分光光度計 (set to 490 nm)
  • 多通道移液槍 (推薦大量程的)

樣品量

傳統 Pull-Down方法

300 - 2000 μg 每次

假如樣本量有限,例如原代細胞檢測,推薦使用G-LISA分析方法

G-LISA方法

5 – 50 μg 每次

成本考量

傳統 Pull-Down方法

可用:

  • 小型盒子 (10 assays each RhoA/Rac1/Cdc42)
  • 中型盒子 (20 assays)
  • 常規盒子(50-80 assays depending on target protein)

傳統的 pull-down 小型盒子提供最低的成本

G-LISA方法

96孔板形式,每孔可拆卸單獨使用

 

G-LISA 最佳性價比

樣品處理

傳統的 Pull-Down方法

離心操作和 western blot 檢測適用于低樣本數量(≤10)

小于10種樣品:任意選擇

G-LISA方法

高樣本數量 (>10)或者劑量反應/時程分析,每孔可以分離并單獨使用

大于10 種樣品:推薦G-LISA

定量結果

傳統的Pull-Down方法

Western blot定量只有狹窄的線性范圍,并且樣品多步處理會導致含量測定有變化

 

G-LISA方法

提供單一的數字讀出

G-LISA分析方法推薦單一,可重復的定量分析

試劑需求但是盒子里沒有

傳統的 Pull-Down方法

  • 細胞或者組織裂解液

  • 蛋白定量試劑

  • 抗小鼠二抗

  • SDS-PAGE 緩沖液

  • SDS-PAGE 膠

  • 分子量標準蛋白Marker

  • Western blot 緩沖液

  • Western blot 檢測試劑

G-LISA 檢測方法提供96孔活性分析的全套試劑,每孔可以拆卸并可單獨使用

G-LISA方法

  • 細胞核組織裂解液

Comparing schematics of Rac1 Activation between Pull-down and G-lisa assays


注:左圖來源于BK030,右圖來源于BK128

G-LISA小 GTPase 活性分析方法為小G蛋白活性分析提供了一種快速、靈敏的檢測方法。

G-Lisa assays



G-LISA方法的優勢:


  • *高靈敏度和準確性

  • *3小時出結果

  • *檢測模式靈活

  • *樣品量需求少

  • *與小鼠、大鼠、人的組織和細胞相兼容

產品信息:

Product Description Cat# Amount List Price ¥
Arf1 G-LISA Activation Assay Kit (Colorimetric Based) - 96 assays BK132 96 assays 11492
Arf6 G-LISA Activation Assay Kit (Colorimetric Based) - 96 assays BK133 24 assays 11492
Cdc42 G-LISA Activation Assay (Colorimetric format) - 24 assays BK127-S 96 assays 6692
Cdc42 G-LISA Activation Assay (Colorimetric format) - 96 assays BK127 96 assays 11492
Rac1 G-LISA Activation Assay (Luminescence format) - 96 assays BK126 96 assays 11492
Rac1 G-LISA Activation Assay Kit (Colorimetric Based) 24 assays BK128-S 24 assays 6692
Rac1 G-LISA Activation Assay Kit (Colorimetric Based) 96 assays BK128 96 assays 11492
Rac1,2,3 G-LISA Activation Assay (Colorimetric format) 96 assays BK125 96 assays 11492
RalA G-LISA Activation Assay Kit (Colorimetric Based) 96 assays BK129 96 assays 11492
Ras G-LISA Activation Assay Kit (Colorimetric Based) - 96 assays BK131 96 assays 11492
RhoA / Rac1 / Cdc42 G-LISA Activation Assay Bundle 3 Kits (24 assays per kit) BK135 3X24 assays 18252
RhoA G-LISA Activation Assay (Luminescence format) 96 assays BK121 96 assays 11492
RhoA G-LISA Activation Assay Kit (Colorimetric format) 24 assays BK124-S 24 assays 6692
RhoA G-LISA Activation Assay Kit (Colorimetric format) 96 assays BK124 96 assays 11492
Total RhoA ELISA BK150 96 assays 6084

Pull-down Assays



小G蛋白pull-down活性分析利用偶聯效應蛋白的親和珠子選擇性的去結合活性 GTPase, 再利用高同型特異性抗體 Western blot定量分析. 這些分析兼容小鼠、大鼠、人組織及細胞的裂解液。?除了終止液,試劑盒包含所有試驗組分, 除此之外, 小G蛋白親和珠子,抗體,蛋白,激活劑及抑制劑可以單獨購買

產品信息:

Product Description Cat# Amount List Price ¥
RhoA / Rac1 / Cdc42 Activation Assay Combo Biochem Kit (bead pull-down format) - 3 x 10 assays BK030 3 x 10 assays 11357
Arf1 Pull-down Activation Assay Biochem Kit (bead pull-down format) - 20 Assays BK032-S 20 assays 5340
Arf6 Pull-down Activation Assay Biochem Kit (bead pull-down format) - 20 Assays BK033-S 20 assays 5340
Cdc42 Pull-down Activation Assay Biochem Kit (bead pull-down format) - 20 Assays BK034-S 20 assays 5340
Cdc42 Pull-down Activation Assay Biochem Kit (bead pull-down format) - 50 Assays BK034 50 assays 9329
PAK-PBD beads (binds active Rac/Cdc42 proteins) PAK02 1 x 500 μg 5611
Rac1 Pull-down Activation Assay Biochem Kit (bead pull-down format) - 20 Assays BK035-S 20 assays 5340
Rac1 Pull-down Activation Assay Biochem Kit (bead pull-down format) - 50 Assays BK035 50 assays 9329
RalA Activation Assay Biochem Kit (bead pull-down format) - 50 Assays BK040 50 assays 9329
Ras Pull-down Activation Assay Biochem Kit (bead pull-down format) - 20 Assays BK008-S 20 assays 4664
Ras Pull-down Activation Assay Biochem Kit (bead pull-down format) - 50 Assays BK008 50 assays 9329
RhoA Pull-down Activation Assay Biochem Kit (bead pull-down format) - 20 Assays BK036-S 20 assays 5340
RhoA Pull-down Activation Assay Biochem Kit (bead pull-down format) - 80 Assays BK036 80 assays 9329
Rhotekin-RBD beads (binds active Rho proteins) RT02 2 x 2 mg 6692

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